操作实务 蚊类监测应知应会
蚊媒传染病是由蚊虫叮咬传播的一类自然疫源性疾病。近年来,寨卡病毒病、黄热病、疟疾、登革热等蚊媒传染病流行呈上升趋势,对口岸公共卫生安全造成了极大威胁。
随着口岸对外开放的不断深入,蚊媒传染病传入传出的风险与日俱增,因此,加强口岸蚊类监测及蚊媒传染病风险分析,对促进我国经济发展,保障边境地区的公共卫生安全具有重要意义;同时,也便于海关工作人员掌握监测对象的种类、数量、分布及季节变化,为预测预报和处理应急事件积累基础数据,为疾病的预防控制提供技术支撑,为制定科学合理的防治方案提供依据。
目前,蚊类监测主要包括成蚊监测和幼虫监测。
幼虫监测方法及注意事项
幼虫监测的主要工具有舀水勺、捕虫网、长吸管、虹吸管、伊蚊诱卵器等,主要方法包括:
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勺捞法
采集大面积积水(稻田、沟渠、池塘等)中孳生的蚊幼虫,使用标准水勺(400毫升)捞取一定勺数,带回实验室进行分类记数。幼虫密度=各期幼虫总数/勺数。
2
容器记数法
此法适用于小型积水,如瓦罐、树洞、竹筒、石穴等,使用长吸管或虹吸管吸取。其记数单位为每100毫升水中的幼虫数。
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诱卵器法
诱卵器是专门为吸引伊蚊产卵而设计的小型容器,即在其中装入少量水吸引伊蚊产卵,然后通过检查有卵的诱卵器比例,估算出伊蚊密度。
注意事项
1
大面积水体采集时应选择好采集位置,如下风向、水缓处、岸边水草处等。
2
采集动作要迅速。
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容器中盛放的幼虫数量、孳生地的水(清水)量要适度,一般不宜超过容积的1/2。
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运输途中应避免高温、颠簸等。
5
特殊孳生习性蚊幼虫的采集,如曼蚊属的蚊幼虫采集应将水及水草一起迅速捞起,放入盆中,摆动水草使幼虫脱离,然后吸取。
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了解不同种类幼虫孳生的生态习性。
成蚊监测方法及注意事项
成蚊监测的主要工具有BDV双层蚊帐、电动吸蚊器、诱蚊灯、捕虫网等,主要方法包括:
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人帐诱法
选择适当的地点,将诱蚊帐(规格为:帐顶80cm×80cm,顶角至下沿的垂直高度150cm,帐底张开150cm×150cm)悬挂,上下各四角撑开固定,使帐下缘距地面20~30cm高。监测者手持电动吸蚊器和手电筒捕获帐内蚊虫。每次监测30分钟(或根据监测目的设定时间)。选择蚊虫活动高峰期(一般为太阳落山前后1小时内)进行。收集蚊虫分类并计数。
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人工小时法
该方法一般选择成蚊栖息场所作为调查点,用吸蚊管或电动吸蚊器进行捕捉。以一个人工在一定时间内捕获某种蚊虫数作为该种蚊虫的密度。
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人诱法
在蚊虫孳生地附近选择适当地点,采集者直接暴露一侧小腿,静止不动,用吸蚊器吸捕落在小腿上的蚊虫。每次以一定时间为计量单位。密度记数单位为:只/人小时。
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灯诱法
灯诱法利用蚊虫对特殊光线的趋性来引诱蚊虫,并通过特殊装置加以捕捉。常用的灯光有紫外光和普通白炽灯光。灯诱法和其他方法相比,节省人力,数据的可比性强。但由于诱捕的昆虫种类复杂,后期工作较为烦琐。
其他方法
除以上四种方法外,成蚊监测方法还包括挥网法、二氧化碳诱捕法等。
注意事项
1
参加人员应统一培训、统一监测方法。
2
监测时间、地点的确定。
3
监测前相关工具的检查。
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充分考虑到诱饵的个体差异。
5
充分考虑不同蚊种生态习性的差异,如吸血对象、吸血时间等。
6
注意采集地点,采集时间,采集地生境,采集方法、温度、湿度、照度、风速、天气等信息的记录。
蚊虫样品的保存运输
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干保存法
采获的蚊虫成虫经毒杀后,将其放到白纸上,拣除杂物和其他昆虫。在干净的小纸盒底部放一层樟脑粉,然后以软纸压紧,将采获的成虫放到软纸上,并在上面轻覆一层软纸,写好标签,最后将纸盒封好。在条件允许的情况下,将成蚊制成针插标本,写明标签,插在有樟脑的针插标本盒内。
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酒精保存法
幼虫可用50℃~60℃的热水杀死,放入盛有75%酒精的小指管内,加标签,用小棉球堵住,然后把小指管投入盛有75%酒精的乳瓶内。用于制作玻片标本的卵,可固定并保存在5%的酒精中,并按比例加入5%的甘油。
3
干燥器保存法
产在潮湿滤纸上的伊蚊卵,连同滤纸一起放在盛有饱和硝酸钾溶液的干燥器内(勿接触液体),使之保持一定的湿度。保存半年仍能孵出幼虫。
4
冷藏保存法
采获的蚊虫成虫经毒杀后,将其放在白纸上,拣除杂物和其他昆虫。放入培养皿,密封后放在4℃冷藏短期保存,可供后续的形态学及分子生物学研究(如DNA提取)。
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冷冻保存法
采获的蚊虫轻微冷冻麻醉后,在冰盘上分别装入离心管或冻存管,立即置于-20℃、-80℃或液氮中冷冻保存。此法适合相关的分子生物学研究,如蚊媒病毒的检测等。
蚊虫标本的制作
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成虫针插标本制作方法(双针法)
将0号微针先插在小软木块的一端,然后用一根3号长针与微针针尖反向插于同一小木块的另一端,使软木块位于3号针上部的1/3处。
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用制作好的双针中的微针针尖,插入蚊胸部腹面中央即可。
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插好的标本应是3号针在右,微针在左,虫的头部向前,腿部舒展,两翅最好呈90度平展。
注意事项
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微针插入胸部时,不要插透至胸背。
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用不褪色的墨笔写好标签。
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标签插在主针上,右边与小木块的右端平齐。
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虫体的位置应低于主针的顶部。
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幼虫玻片标本制作方法
将四龄的蚊幼虫用50℃~60℃的热水杀死
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移入75%的酒精中,放置10分钟
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移入95%的酒精中,脱水30分钟
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移入无水酒精中,脱水30分钟
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脱水后的成熟幼虫背面朝上,置于已准备好的载玻片上,用手术刀片将虫体从中部剖断,摆正位置,加一滴加拿大树胶酚
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标本稍干后,盖上盖玻片
注意事项
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取幼虫时注意不要将幼虫体上的毛碰掉。
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加拿大树胶酚的量要适中,做到盖上盖玻片能够充满,但不可溢出,并且虫体也可完全浸在胶中。
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若消化道内含有较多食物,可将活幼虫放入1%硫酸镁溶液中1小时左右,除去肠内食物。
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标签的书写
标签是对标本采集时间、地点、采集者等信息的具体记载,对昆虫的采集工作非常重要。一个完好的标本如果没有标签就失去了研究的价值。
针插标本标签包括以下信息:
标本编号、中文名、拉丁文名,采集地点、采集时间、采集人。
玻片标本标签包括以下信息:
标本编号、中文名、拉丁文名、虫期、采集地点、采集时间、采集人。
文 / 蒋晓玲 黄凯 姚武
(乌鲁木齐海关)
文章来源于《中国海关》杂志2021年4月